pcr实验室压差设计要求

文  本  目  录

• PCR实验室污染的预防和控制管理规范
• PCR实验室装修设计方案及装修
• PCR实验室空调通风系统设计及压力控制
• PCR实验室工作区域仪器设备配置标准
• PCR实验室试剂储存和准备区操作规范
• PCR扩增检测实验室人流物流设计规范

PCR实验室污染的预防和控制管理规范

PCR实验室污染的预防和控制管理规范
PCR实验室设计的核心问题是如何避免污染。在实践中，有几种常见的污染类型：扩大产物污染；自然基因组DNA污染；试剂和标本之间的污染。一旦发生污染，必须停止实验，直到找到污染源，实验结果必须无效，需要重新进行实验。因此，在污染发生后，在实验室周围寻找污染源不仅需要时间和繁琐，而且浪费人力和物力资源。因此，为了避免污染，首先应该是预防，而不是排除。

PCR实验室装修设计方案及装修

PCR实验室装修设计方案及装修
(1)必须为PCR实验室安全运行、清洁和维护提供了足够的空间。
(2)PCR实验室墙面、天花板、地板应光滑、易清洗、防渗漏、耐化学品、消毒剂腐蚀。地板应防滑。
(3)试验台面应防水，并能承受消毒剂、酸、碱、有机溶剂和中热的作用。
(4)应保证PCR所有实验室活动的照明，避免不必要的反射和闪光。
(5)PCR实验室设备应坚固耐用，在实验台、橱柜等设备之间及以下要保证足够的清洁空间。
(6)应有足够的存储空间随时摆放物品，在使用中，PCR还应在实验室工作区外提供另一个可长期使用的存储室。
(7)应为压缩气体和液化气体提供足够的空间和设施进行安全操作和储存。
(8)PCR实验室门应有可视窗，并达到适当的防火等级，以便自动关闭
(9)安全系统应包括消防、应急供电、应急淋浴和洗眼设施。
(10)电力供应和应急照明可靠、充足，确保人员安全离开PCR实验室。
(11)设备的设计、施工和安装应易于操作、维护、清洁、去除污染和质量检验。尽量避免使用玻璃和其他易碎物品。

PCR实验室空调通风系统设计及压力控制

为了避免各实验区之间交叉污染的可能性，PCR实验室没有严格的净化要求，但应采用全排气组织的形式。同时，应严格控制空气供给和排气比例，以确保各实验区域的压力要求。
1.PCR实验室扩增反应混合物配制和扩增主要用于DNA或CDNA扩增。
2.PCR实验室标本制备区域的主要操作是保存临床标本、提取、储存核酸(RNa.DNA)、添加扩展反应管和测量RNA。
3.PCR实验室扩增产品分析区的区域主要用于测量扩增片段。如果使用自动封闭式分析仪器进行测试，则不能设置此区域。
4.PCR实验室试剂储存和准备区的主要操作是储存试剂的制备。制备试剂和主反应混合物。该区域对气流压力控制没有严格要求。

PCR实验室工作区域仪器设备配置标准

1.试剂贮存和准备区 2～8℃和-15℃冰箱：混匀器；微量加样器（覆盖1～1000
μl）；移动紫外灯（近工作台面）；消耗品：一次性手套、一次性吸水纸、耐高压处理的离心管和加样器吸头（带滤心）；专用工作服和工作鞋；专用办公用品等。
2.标本制备区 2～8℃冰箱，-20℃或-80℃冰箱；高速台式冷冻离心机；混匀器；
水浴箱或加热模块；微量加样器（覆盖1～1000μl）；可移动紫外灯（近工作台面）；超净工作台，消耗品；一次性手套、一次性吸水纸、耐高压处理的离心管和加样器吸头（带滤心）；专用工作服和工作鞋；专用办公用品等。 ? 扩增反应混合物配制和扩增区核酸扩增仪；微量加样器（覆盖1～1000μl）；
可移动紫外灯（近工作台面）；消耗品：一次性手套、一次性吸水纸、耐高压处理的离心管和加样器吸头（带滤心）；专用工作服和工作鞋；专用办公用品等。
3.扩增产物分析区视检测方法不同而定。基本仪器设备如下：微量加样器（覆盖1～200μl）；可移动紫外灯（近工作台面）；消耗品：一次性手套、一次性吸水纸、耐高压处理的离心管和加样器吸头（带滤心）；专用工作服和工作鞋；专用办公用品等。

PCR实验室试剂储存和准备区操作规范

PCR实验室试剂储存和准备区操作规范
实验区的主要操作是储存试剂的制备、试剂的分包装和主反应混合物的制备。用于标本生产的试剂和材料应直接运输到该区域，不得通过其他区域。试剂原料必须储存在该区域，并制备所需的储存试剂。这个区域对气流压力的控制没有严格的要求。该地区的主要操作是保存临床标本和核酸(RNa.DNA)提取、存储和添加到扩增反应管和测定RNA时cDNA的合成。区域的压力梯度要求为：相对于相邻区域的正压，以避免从相邻区域进入该区域的气溶胶污染。此外，由于在样品添加过程中可能会发生气溶胶污染，因此应避免在该区域不必要的行走。

PCR扩增检测实验室人流物流设计规范

PCR扩增检测实验室人流物流设计规范
1.试剂存储和准备区。贮存试剂和用于标本制备的消耗品等材料应当直接运送至试剂贮存和准备区，不能经过扩增检测区，试剂盒中的阳性对照品及质控品不应当保存在该区，应当保存在标本处理区。
2.标本制备区。针对有可能会发生气溶胶所致的污染，可通过在本区内设立正压条件，避免从邻近区进入本区的气溶胶污染。为避免样本间的交叉污染，加入待测核酸后，必须盖好含反应混合液的反应管。对具有潜在传染危险性的材料，必须在生物安全柜内开盖，并有明确的样本处理和灭活程序。
3.扩增区。为避免气溶胶所致的污染，应当尽量减少在本区内的走动。必须注意的是，所有经过检测的反应管不得在此区域打开。
4.扩增产物分析区。核酸扩增后产物的分析方法多种多样，如膜上或微孔板或芯片上探针杂交方法、直接或酶切后琼 脂糖凝胶电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳、核酸测序方法、质谱分析等。