PCR病毒核酸检测实验室在近期的新型病毒防控中起到重要作用。为了防止交叉污染，缓冲间和核心工作间一定要设置为负压，清洁区则设置为常压。对PCR实验室的各实验房间压差控制一定要严格处理，尤其是基因扩增和产物区的气流不能互相串通，以免引起检测提取数据的重叠失效。

一、pcr实验室建设标准规范

《实验室生物安全通用要求》国家标准GB19489-2008

《临床基因扩增检验实验室工作规范》卫医发[2002]8号文

《临床基因扩增检验实验室管理暂行办法》卫医发[2002]10号文

《临床基因扩增检验实验室设计标准》卫医发[2002]10号文附件

《基因检验实验室技术要求》国家质监检验总局SN/T1193-2003

《洁净室及相关受控环境-生物污染控制》国际标准ISO14698

《洁净厂房设计规范》国家标准GB500732013

《洁净室施工及验收规范》GB50591-2010

《室内空气质量标准》国家标准GB/T18832002

《生物安全实验室建筑技术规范》国家标准GB50346-2011

《病原微生物实验室生物安全管理条例》卫生部(2004-11-12)

二、PCR实验室区域划分

1、功能划分

试剂准备区、标本制备区、扩增反应一区、纯化区、扩增反应二区、后纯化区（如上布局图）。

2、DCKL设计原则

按国家卫生部的要求，各实验区域必须是相互独立的，不能直通，每个独立实验区设有专门的闸间供工作人员换工作服和鞋，进入各工作区域必须严格遵循单一方向顺序，即只能从左边试剂准备区，标本制备区，扩增反应一区，纯化区，扩增反应二区到后纯化区，避免发生交叉污染。

3、为避免样本间的交叉污染，房间采取净化控制，总体设计为10万级。闸间（缓冲间）设计为正压区，保证与外界环境隔离，避免从邻近区域进入本区域的气溶胶污染。
 

三、PCR实验室气流设计

人流物流设计各行其道，避免交叉混杂，整个区域设计一个公用走廊，工作区域之间设计试剂物品传递专用窗，做到人物分流。

1、物流：在试剂准备区与标本制备区、标本制备区与PCR扩增区之间，以及扩增区域和纯化区之间设计有电子连锁不锈钢传递窗，以单向进行试剂、标本等物品传送，配制的试剂通过单向传递窗由试剂准备区传递到标本制备区，处理过的标本通过单向传递窗由标本制备区传递到PCR扩增区，按照工艺流程逐次传递，避免返流。单向物品传送系统既保障了标本试剂不受污染，又保障了标本试剂不污染环境。

2、人流：人员通过闸间分别进入各自实验区域，进出各实验区域需要在闸间区域更换洁净工作服，手消毒等。
 

四、实验室压差控制的原理

根据PCR操作流程方向，试剂准备，标准制备，扩增区，产物分析区。相对压差也应从试剂准备至产物分析方向由高到低的过程。不过在实际的使用调剂过程中我们会遇到缓冲的气压很难调到设定值，若扩增和产物缓冲区的—5~—10Pa，在调试过程中会出现压差不平衡的问题，比如洁走廊往缓冲方向流入缓冲就是小负压室，缓冲再被动流入负压内室就应变为正压，从而缓冲间排风大于送风量，也就是送风设置为关闭状态后基本可以实现负压的设定值，因此关闭送风维持负压状态是不可行的。

其实我们只要了解PCR关键性能后也可以取另外的方式来实现气流合理性的控制，比如PCR缓冲间理解为第二气阀室(室内与缓冲间是两层隔离屏障，洁净走廊对外是一层屏障)，所以缓冲间的设置正压值是很有必要也是符合使用标准的。
 

五、PCR实验室功能区的压力控制标准

① 压力梯度宜在10Pa及以上

② 两种控制方式：系统控制和排风功率变化。系统控制即4个房间的压力控制应同时启停；排风控制即排风管道应分支，否则实验室停运时风流倒灌，造成污染。

④ 核酸扩增室及产物分析室应呈微负压，以防含核酸的气溶胶扩散出去污染试剂与样品，可以通过控制排风风量大于进风风量达到负压效果。

⑤ 在理想情况下，PCR实验室缓冲间内，可设置正压，使室内空气不流向室外，室外空气不流向室内。PCR实验室进风由原有中央空调控制，要求将中央空调风口安装到指定定点，且高度为地面铺装好后2600mm处。